Протоночная цитометрия

Слайд 2

Проточная цитометрия. Клетки крови можно дифференцировать на основе лазерной цитофлюорометрии. Искомые

Проточная цитометрия.

Клетки крови можно дифференцировать на основе лазерной цитофлюорометрии. Искомые

клетки, точнее их маркеры – CD-антигены, окрашивают флюоресцирующими антителами. Для окрашивания клеток (например, CD4+, CD8+-Т-лимфоцитов) применяют моноклональные антитела против их CD-антигенов, меченные флюоресцеинизотиоцианатом (ФИТС), дающим зеленую флюоресценцию, или фикоэритрином, дающим красное свечение.
Слайд 3

.

.

Слайд 4

Образец крови после обработки меченными моноклональными антителами пропускают через тонкую трубку.

Образец крови после обработки меченными моноклональными антителами пропускают через тонкую трубку.

Через исследуемый образец пропускают лазерный луч, который возбуждает свечение флюорохрома.
Слайд 5

Фотоумножитель улавливает светорассеивание, по которому анализируется размер, гранулярность клетки, и регистрирует

Фотоумножитель улавливает светорассеивание, по которому анализируется размер, гранулярность клетки, и регистрирует

флюоресценцию, свидетельствующую о количестве меченых антител, связанных с клеткой. Интенсивность флюоресценции коррелирует с плотностью антигенов на поверхности клеток и может быть количественно измерена с помощью фотоэлемента. Полученные результаты преобразуются в гистограмму.
Слайд 6

Рис.32. Проточная цитометрия (гистограмма)

Рис.32. Проточная цитометрия (гистограмма)

Слайд 7

Проточная цитометрия. Образцы кровь костный мозг ликвор суставная жидкость плевральная жидкость

Проточная цитометрия.

Образцы
кровь
костный мозг
ликвор
суставная жидкость
плевральная жидкость
асцитическая жидкость
суспензированные клетки тканей (например, опухолей)
суспензия микрочастиц

(флуоресцентные микросферы и т.п.)
Слайд 8

Проточная цитометрия. Преимущества короткое время анализа за счет высокой скорости (до

Проточная цитометрия.

Преимущества
короткое время анализа за счет высокой скорости (до 100 000

событий в секунду)
анализ большого количества клеток (до 108 клеток в мл)
определение субпопуляций клеток
измерение параметров редко встречающихся клеток
объективное измерение интенсивности флуоресценции