Возбудители брюшного тифа и паратифа. Микробиологическая диагностика

Содержание

Слайд 2

Морфологические и культуральные свойства Мелкие Грам «-» палочки с закругленными концами.

Морфологические и культуральные свойства

Мелкие Грам «-» палочки с закругленными концами. Подвижны

за исключением некоторых сероваров. Не образуют спор и капсул. Диапазон роста при Т° 8 - 45°, Т° оптим. 37° С, рН 4,1 – 9,0; рН оптим. 7,2 – 7,4. Факультативные анаэробы.
Хорошо растут на обычных питательных средах. На агаре S-формы вырастают в виде небольших колоний d до 2 – 4 мм прозрачных, нежных, слегка выпуклых с ровным краем. В R-форме колонии более плоские, шероховатые с изрезанными краями.
Слайд 3

Культуральные свойства S. enteritidis S. paratyphi B через 2 – 3

Культуральные свойства

S. enteritidis S. paratyphi B через 2 – 3 суток

инкубации при комнатной Т° образуют по периферии колоний слизистый вал.
На среде Эндо колонии сальмонелл прозрачные, на среде Плоскирева – бесцветные, более плотные и мутноватые. На ВСА – черные с металлическим блеском (у С., образующих сероводород).
В бульоне гладкие формы С. дают равномерное помутнение, шероховатые – осадок на дне пробирки.
Слайд 4

Рост возбудителей брюшного тифа (справа) и паратифа В в бульоне Колонии

Рост возбудителей брюшного тифа (справа) и паратифа В в бульоне

Колонии возбудителя

брюшного тифа на среде Эндо

Колонии сальмонеллы паратифа В на среде Эндо

Колонии возбудителя паратифа В на среде Плоскирева

Слайд 5

Рост S. раratyphi В, продуцирующих сероводород, на ВСА Рост возбудителей брюшного

Рост S. раratyphi В, продуцирующих сероводород, на ВСА

Рост возбудителей брюшного тифа

(справа) и паратифа В на среде Клиглера

Тест на подвижность сальмонелл (посев S. typ)hi в 0,3% ПЖА

Образование пузырьков газа S. paratyphi В в 0,3% ПЖА

Рост сальмонелл на среде Симмонса

Слайд 6

Биохимические свойства Разнообразны и различаются в пределах одного серовара. Сальмонеллы разлагают

Биохимические свойства

Разнообразны и различаются в пределах одного серовара. Сальмонеллы разлагают глюкозу

до кислоты и газа (кроме S. typhi), не ферментируют лактозу, сахарозу, не расщепляют мочевину, образует сероводород, индол не продуцирует.
Имеют ферменты лизин- и орнитинде-карбоксилазу и аргининдигидролазу.
Дают положительную реакцию с метиловым красным, образуют ацетоин в реакции Фогеса - Проскауэра.
Слайд 7

Антигенная структура О-Аг – соматический, термостабилен. По нему проводится разделение сальмонелл

Антигенная структура

О-Аг – соматический, термостабилен. По нему проводится разделение сальмонелл на

серогруппы.
Н-Аг – жгутиковый, белковый, термолабилен. Может существовать в 2-х фазах – специфической и неспецифической (или 1-й и 2-й).
Vi-Аг – Аг вирулентности, поверхностный. Термолабилен, разрушается при кипячении через 10 минут.
К-Аг – поверхностный. Стимулирует синтез АТ.
М-Аг – слизистый, присутствует у слизистых штаммов.
Слайд 8

Серологическую идентификацию С. проводят с учетом трех основных Аг: О-, Н-

Серологическую идентификацию С. проводят с учетом трех основных Аг:
О-, Н- и

Vi-Аг.
Принцип положен в основу диагностической антигенной схемы Кауфмана-Уайта.
На основе наборов О-Аг все С. разделены на 67 серогрупп: А, В, С, и т. д.; с учетом Н-Аг – на серовары.
В 1992 г. было известно 2324 серовара.
Слайд 9

Серологическая идентификация Серологическая идентификация С. начинается с постановки ОРА на стекле

Серологическая идентификация

Серологическая идентификация С. начинается с постановки ОРА на стекле с

поливалентной сальмонеллезной сывороткой АВСДЕ, включающей АТ ко многим известным С.; далее ОРА развертывается с О- и Н- монорецепторными сыворотками.
Серологическая диагностика: РНГА в парных сыворотках с эритроцитарными О-диагностикумами, Vi-брюшнотифоз-
ным диагностикумом .
Слайд 10

Материал для исследования: кровь – на 1 – 2 неделе в

Материал для исследования:
кровь – на 1 – 2 неделе в период

бактериемии;
испражнения – со 2 – 3-й недели болезни и у б/носителей;
моча – с конца 2-й недели и у некоторых б/носителей;
желчь – в течение всей болезни и у б/носителей;
содержимое розеолы– при их наличии
гной
спиномозгового ликвора при имеющихся осложнениях и специальных показаниях.
При пищевых токсикоинфекциях – продукты питания
Слайд 11

Лабораторная диагностика Испражнения; Рвотные массы; Промывные воды желудка; Желчь; Кровь; Моча;

Лабораторная диагностика

Испражнения;
Рвотные массы;
Промывные воды желудка;
Желчь;
Кровь;
Моча;
Содержимое розеол;
Гной;
Спиномозговой ликвор;
Секционный материал.

Слайд 12

СРЕДЫ ДЛЯ ВЫДЕЛЕНИЯ КИШЕЧНЫХ БАКТЕРИЙ Элективные среды: Желчный бульон - б-н

СРЕДЫ ДЛЯ ВЫДЕЛЕНИЯ КИШЕЧНЫХ БАКТЕРИЙ

Элективные среды:
Желчный бульон - б-н с добавлением

10 – 20% желчи;
Среда Рапоппорт – б-н, 10% желчи, 2% глюкозы и 1% индикатора (Андреде или БТС);
Среды обогащения:
Селенитовый бульон,
Среды Мюллера, Кауфмана
Слайд 13

ДИФЕРЕНЦИАЛЬНО - ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ СРЕДЫ: Среда Эндо – лактоза, индикатор фуксин, стабилизатор

ДИФЕРЕНЦИАЛЬНО - ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ СРЕДЫ:

Среда Эндо – лактоза, индикатор фуксин, стабилизатор окраски

– сульфит натрия;
Среда Левина (ЭМС) – лактоза, эозин, метиленовый синий;
Среда Плоскирева – лактоза, соли желчи, бриллиантовый зеленый, йод, индикатор нейтральный красный;
Висмут-сульфит агар – бриллиантовый зеленый и основной висмут, сульфит железа.
Слайд 14

СРЕДЫ ДЛЯ ИДЕНТИФИКАЦИИ Среды Гисса; Ресселя I – 0,4% агар, 0,1%

СРЕДЫ ДЛЯ ИДЕНТИФИКАЦИИ

Среды Гисса;
Ресселя I – 0,4% агар, 0,1% глюкозы,

1% лактозы, индикатор;
Ресселя II – 0,1% маннита, 1% сахарозы, индикатор;
Среда Клиглера – 0,1% глюкозы, 1% лактозы, соли железа для улавливания сероводорода, индикатор феноловый красный.
Среда Олькеницкого – 0,1% глюкозы, 1% лактозы, 1% мочевины, соль Мора для улавливания сероводорода, индикатор феноловый красный. Выявляет ферментацию сахаров, образование сероводорода и уреазную активность
Слайд 15

СРЕДА ПЛОСКИРЕВА СРЕДА ВСА

СРЕДА ПЛОСКИРЕВА
СРЕДА ВСА

Слайд 16

Слайд 17

ЭТАПЫ ИССЛЕДОВАНИЯ 1 ДЕНЬ Подготовка материала к исследованию; Бактериоскопия нативного материала

ЭТАПЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

1 ДЕНЬ
Подготовка материала к исследованию;
Бактериоскопия нативного материала (при анализе материала

из стерильных полостей и гноя);
Посев в среды обогащения: селенитовый бульон, среду Рапопорта, Кауфмана
Кровь, желчь, спиномозговой ликвор – в желчный бульон, среду Рапопорт
Посев на плотные элективные и селективные среды – Эндо, Левина, Плоскирева, ВСА
Инкубация при температуре 37 градусов 24 часа.
Слайд 18

2-Й ДЕНЬ Просмотр посевов нативного материала на плотных и жидких средах;

2-Й ДЕНЬ

Просмотр посевов нативного материала на плотных и жидких средах;
Отбор

подозрительных лактозо «-» колоний, приготовление мазков по Граму, просмотр;
Пересев из них на ПУС для изучения биохимической активности, сектора среды Эндо или косяки МПА для накопления чистой культуры;
Слайд 19

Высев из сред обогащения на плотные среды, приготовление мазка с окраской

Высев из сред обогащения на плотные среды, приготовление мазка с окраской

по Граму;
Изучение подвижности методом висячей или раздавленной капли или посевом в 0,3% полужидкий агар;
Посев в питательный бульон + индикаторные полоски на выявление индола и сероводорода;
Посев в среду Симмонса;
Постановка ОРА с поливалентной эшерихиозной сывороткой ОКА.
Слайд 20

3-Й ДЕНЬ ИССЛЕДОВАНИЯ Первичное изучение биохимической активности на ПУС, определение подвижности

3-Й ДЕНЬ ИССЛЕДОВАНИЯ

Первичное изучение биохимической активности на ПУС, определение подвижности (учет

тестов);
Изучение АГ-го строения выделенной культуры с использованием поливалентных сывороток к шигеллам, сальмонеллам, ЭПКП;
Подбор необходимого набора биохимических тестов для определения рода возбудителя и посев.
Проба на чувствительность к АБ-м методом дисков.