Лабораторная диагностика ВИЧ-инфекции

Август 5, 2022

Главная
Медицина
Лабораторная диагностика ВИЧ-инфекции

Содержание

2. Санитарно-эпидемиологические правила СП 3.1.5.2826:10 «ПРОФИЛАКТИКА ВИЧ-ИНФЕКЦИИ» утверждены постановлением главного санитарного врача РФ в 2011г., редакция изменений
3. Показания для обследования на ВИЧ-инфекцию СП 3.1.5.2826:10 «Профилактика ВИЧ-инфекции» Приложение N 1. «Контингенты, подлежащие обязательному медицинскому
4. Рекомендуются для добровольного обследования: >Беременные и их половые партнеры >Дети с перинатальным контактом по ВИЧ-инфекции >Уязвимые
5. Словарь терминов Чувствительность теста – способность точно выявлять все случаи инфицирования Специфичность теста – способность точно
6. Методы лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции Серологические методы, основанные на реакции связывания «антиген-антитело», где выявляют антитела и/или антигены
7. Основа лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции в особых случаях * выявление антител к ВИЧ и антигенов ВИЧ выявление
8. Алгоритм тестирования на ВИЧ-инфекцию I этап: СКРИНИНГ ИФА / ИХЛА / ЭХЛА II этап: ПОДТВЕРЖДЕНИЕ ИММУННЫЙ
9. Серологические тесты на ВИЧ-инфекцию Источник:
10. ПЦР Rosenberg NE at al. // Curr Opin HIV AIDS. 2015 Jan;10(1):61-8.
11. Этап I. Скрининг повтор ИФА/ИХЛА дважды Первично-положительный скрининг Этап II. Подтверждение в референс-лаборатории ИФА/ИХЛА альтернативная тест-система
12. ИММУННЫЙ БЛОТ Строение ВИЧ-1 Полный иммунный блот с типичным набором антител к антигенам ВИЧ-1
13. Результаты иммунного блота Положительный: обязательно присутствуют антитела к двум из трех гликопротеинов ВИЧ (gp 160, gp
14. Процесс сероконверсии в иммунном блоте
16. БЫСТРЫЕ ТЕСТЫ НА ВИЧ-ИНФЕКЦИЮ (ЭКСПРЕСС-ТЕСТЫ) Соответствуют скрининговым тестам, требуют подтверждения стандартными методами Результат через 15-30 минут
17. ЛОЖНЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ СЕРОЛОГИЧЕСКИХ ТЕСТОВ Ложноотрицательные результаты при поиске антител: Период «серологического окна» поздние стадии ВИЧ-инфекции, истощение
18. ПОЛИМЕРАЗНАЯ ЦЕПНАЯ РЕАКЦИЯ Показания к проведению ПЦР для подтверждения ВИЧ-инфекции: период «серологического окна» сомнительный результат иммунного
19. «5.1. …Присутствие антител к ВИЧ, РНК или ДНК ВИЧ является лабораторным доказательством наличия ВИЧ-инфекции … »
20. ИММУНОГРАММА Дополнительное исследование Определение клеточного состава (иммунофенотипирование) лимфоцитов крови методом проточной цитофлюориметрии Т-хелперы (CD4+ лимфоциты) норма
21. ЗАКЛЮЧЕНИЕ Лабораторное исследование на ВИЧ-инфекцию в РФ проводят добровольно, с согласия человека и после обязательного консультирования
22. ЛИТЕРАТУРА Санитарно-эпидемиологические правила СП 3.1.5.2826:10 «Профилактика ВИЧ-инфекции» (от 11.01.2011г, с изменениями от 21.07.2016г) Национальные рекомендации по
23. БЛАГОДАРЮ ЗА ВНИМАНИЕ
26. Скачать презентацию

Слайд 2

Санитарно-эпидемиологические правила СП 3.1.5.2826:10 «ПРОФИЛАКТИКА ВИЧ-ИНФЕКЦИИ» утверждены постановлением главного санитарного врача РФ в

2011г., редакция изменений утверждена в 2016г. «5.2. Освидетельствование на ВИЧ-инфекцию проводится добровольно, за исключением случаев, когда такое освидетельствование является обязательным.» «5.3. По желанию освидетельствуемого лица добровольное тестирование на ВИЧ может быть анонимным.» «5.6. Освидетельствование на ВИЧ-инфекцию проводится с обязательным до- и послетестовым консультированием по вопросам профилактики ВИЧ-инфекции…»

Слайд 3

Показания для обследования на ВИЧ-инфекцию СП 3.1.5.2826:10 «Профилактика ВИЧ-инфекции» Приложение N 1. «Контингенты,

подлежащие обязательному медицинскому освидетельствованию на ВИЧ-инфекцию и рекомендуемые для добровольного обследования на ВИЧ-инфекцию» Обязательному обследованию подлежат: >Доноры биологических жидкостей, тканей, органов >Медработники, работающие с ВИЧ, с больными ВИЧ-инфекцией, медработники хирургического профиля >Военнослужащие и курсанты военных учебных заведений >Иностранные граждане и лица без гражданства

Слайд 4

Рекомендуются для добровольного обследования: >Беременные и их половые партнеры >Дети с перинатальным контактом

по ВИЧ-инфекции >Уязвимые группы населения: - наркопотребители - МСМ - КСР - внутренние трудовые мигранты - контактные лица при проведении эпид.расследования - участники аварийной ситуации - заключенные - больные ЗППП - больные ВГВ и ВГС >Лица в возрасте 18 - 60 лет при обращении за медпомощью и диспансеризации в регионах с генерализованной стадией эпидемии >По клиническим показаниям: список более чем 30 состояний, маркирующих ВИЧ-инфекцию и СПИД >Добровольно по инициативе пациента

Слайд 5

Словарь терминов
Чувствительность теста – способность точно выявлять все случаи инфицирования
Специфичность теста

– способность точно подтверждать отсутствие инфицирования
Сероконверсия – процесс выработки специфических антител
Серонегативное окно – период от инфицирования до завершения сероконверсии

Слайд 6

Методы лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции
Серологические методы, основанные на реакции связывания «антиген-антитело», где

выявляют антитела и/или антигены ВИЧ-1/2.
ИФА – иммуноферментный анализ (ELISA)
ИХЛА – иммунохемилюминисцентный анализ (CLIA)
ЭХЛА – электрохемилюминисцентный анализ (ECL)
Иммунный блот (Western Blot, вестерн-блот)
Линейный иммунный анализ
Реакция иммунофлуоресценции
Молекулярно-генетические методы: обнаружение РНК и ДНК ВИЧ
1. ПЦР – полимеразная цепная реакция (качественная, количественная)
2. транскрипционная амплификация нуклеиновых кислот (NASBA)
3. разветвленная ДНК-гибридизация (bDNA) –количественный тест
4. методики для генотипирования ВИЧ, секвенирования ДНК
III. Вирусологические методы

Выявление суммарных антител

Выявление антител к определенным антигенам

Слайд 7

Основа лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции в особых случаях *
выявление антител к

ВИЧ и антигенов ВИЧ

выявление провирусной ДНК ВИЧ и
вирусной РНК ВИЧ
* - у детей первого года жизни
- у лиц, находящихся в инкубационном периоде

Слайд 8

Алгоритм тестирования на ВИЧ-инфекцию

I этап: СКРИНИНГ
ИФА / ИХЛА / ЭХЛА
II

этап: ПОДТВЕРЖДЕНИЕ
ИММУННЫЙ БЛОТ
ПЦР

Критерии выбора тест-системы:
- максимальная чувствительность
- определение антител ВИЧ-1 и ВИЧ-2
- IV поколение тестов

Слайд 9

Серологические тесты на ВИЧ-инфекцию Источник:

Слайд 10

ПЦР
Rosenberg NE at al. // Curr Opin HIV AIDS. 2015 Jan;10(1):61-8.

Слайд 11

Этап I. Скрининг
повтор ИФА/ИХЛА дважды
Первично-положительный скрининг
Этап II. Подтверждение в референс-лаборатории
ИФА/ИХЛА альтернативная

тест-система

ИФА/ИХЛА иная альтернативная тест-система

Иммунный/линейный блот

Положительный

Неопределённый

Отрицательный

Определение антигена р25/24 ВИЧ или ДНК/РНК ВИЧ; обследование на ВИЧ-2

Повторить серологическое исследование через 2 недели, через 3 месяца

Результат

выявлен антиген р25/24 ВИЧ или ДНК/РНК ВИЧ

Дообследование в специализированной мед. организации

Слайд 12

ИММУННЫЙ БЛОТ
Строение ВИЧ-1
Полный иммунный блот с типичным набором антител к

антигенам ВИЧ-1

Слайд 13

Результаты иммунного блота
Положительный: обязательно присутствуют антитела к двум из трех гликопротеинов

ВИЧ (gp 160, gp 120, gp 41), соответствует завершению сероконверсии
Отрицательный: антитела отсутствуют
Неопределённый (сомнительный): набор антител не соответствует критериям положительного результата (сероконверсия не завершена или ложноположительная реакция)

Слайд 14

Процесс сероконверсии в иммунном блоте

Слайд 15

Слайд 16

БЫСТРЫЕ ТЕСТЫ НА ВИЧ-ИНФЕКЦИЮ (ЭКСПРЕСС-ТЕСТЫ)
Соответствуют скрининговым тестам, требуют подтверждения стандартными методами
Результат

через 15-30 минут
Не требуют специального оборудования и сложного обучения
Материал: плазма и сыворотка крови, цельная кровь, в т. ч. капиллярная, моча, транссудат слизистой оболочки ротовой полости (околодёсенная жидкость)

ПОКАЗАНИЯ К ПРИМЕНЕНИЮ:
> Беременные с неизвестным ВИЧ-статусом в предродовом периоде
> Экстренные операции
> Аварийные ситуации
> Работа с труднодоступными группами населения

Слайд 17

ЛОЖНЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ СЕРОЛОГИЧЕСКИХ ТЕСТОВ
Ложноотрицательные результаты при поиске антител:
Период «серологического окна»
поздние стадии

ВИЧ-инфекции, истощение иммунной системы
Ложноположительные результаты при поиске антител:
кросс-реактивность при стимуляции иммунной системы
> беременность
> аутоиммунные заболевания
> поствакцинальный период
> хронический диализ
> инфекционные заболевания
технические ошибки

Слайд 18

ПОЛИМЕРАЗНАЯ ЦЕПНАЯ РЕАКЦИЯ
Показания к проведению ПЦР для подтверждения ВИЧ-инфекции:
период «серологического окна»
сомнительный

результат иммунного блота
обследование детей, родившихся от ВИЧ-инфицированных матерей
обследование донорской крови
Ложноотрицательные результаты ПЦР:
Инфицирование ВИЧ-2
Мутации ВИЧ
«Элитные контроллеры»
Эффективная АРВТ

Слайд 19

«5.1. …Присутствие антител к ВИЧ, РНК или ДНК ВИЧ является лабораторным

доказательством наличия ВИЧ-инфекции … » «5.11.3. Диагноз болезни, вызванной вирусом иммунодефицита человека, устанавливается врачом Центра по профилактике и борьбе со СПИД или врачом уполномоченной специализированной медицинской организации … на основании комплекса эпидемиологических данных, результатов клинического обследования и лабораторных исследований (в том числе только на основании выявления ДНК или РНК ВИЧ) … » (Санитарно-эпидемиологические правила СП 3.1.5.2826:10 «Профилактика ВИЧ-инфекции» (от 11.01.2011г, с изменениями от 21.07.2016г))

Слайд 20

ИММУНОГРАММА
Дополнительное исследование
Определение клеточного состава (иммунофенотипирование) лимфоцитов крови методом проточной цитофлюориметрии
Т-хелперы (CD4+

лимфоциты)
норма > 500 кл/мкл; > 35 %
Иммунорегуляторный индекс
(норма > 1)

Слайд 21

ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Лабораторное исследование на ВИЧ-инфекцию в РФ проводят добровольно, с согласия человека

и после обязательного консультирования по вопросам профилактики
Основой лабораторного подтверждения ВИЧ-инфекции является выявление антител и антигенов ВИЧ, а в особых случаях, выявление ДНК/РНК ВИЧ
Лабораторное исследование проводят в два этапа: скрининг (ИФА/ИХЛА) и подтверждение (иммунный блот, ПЦР)
При обнаружении антител/антигенов/ДНК/РНК ВИЧ человека направляют для дообследования в специализированную медицинскую организацию
Диагноз «ВИЧ-инфекция» устанавливают на основании комплекса эпидемиологических, клинических и лабораторных данных

Слайд 22

ЛИТЕРАТУРА Санитарно-эпидемиологические правила СП 3.1.5.2826:10 «Профилактика ВИЧ-инфекции» (от 11.01.2011г, с изменениями от 21.07.2016г) Национальные

рекомендации по диспансерному наблюдению и лечению больных ВИЧ-инфекцией. Клинический протокол. 2016. Consolidated guidelines on HIV testing services. Geneva: World Health Organization; 2015. (Сводное руководство по услугам тестирования на ВИЧ. ВОЗ. Женева, 2015) ВИЧ 2014/15 (www.hivbuch.de) / Под ред. Кристиана Хоффмана (Christian Hoffmann) и Юргена К. Рокштро (Jürgen K. Rockstroh). Medizin Fokus, 2015.

Слайд 23

БЛАГОДАРЮ ЗА ВНИМАНИЕ

Слайд 24

Лабораторная диагностика ВИЧ-инфекции

Содержание

Санитарно-эпидемиологические правила СП 3.1.5.2826:10 «ПРОФИЛАКТИКА ВИЧ-ИНФЕКЦИИ» утверждены постановлением главного санитарного врача РФ в

Показания для обследования на ВИЧ-инфекцию СП 3.1.5.2826:10 «Профилактика ВИЧ-инфекции» Приложение N 1. «Контингенты,

Рекомендуются для добровольного обследования: >Беременные и их половые партнеры >Дети с перинатальным контактом

Словарь терминовЧувствительность теста – способность точно выявлять все случаи инфицированияСпецифичность теста

Методы лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции Серологические методы, основанные на реакции связывания «антиген-антитело», где

Основа лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции в особых случаях * выявление антител к

Алгоритм тестирования на ВИЧ-инфекцию I этап: СКРИНИНГ ИФА / ИХЛА / ЭХЛАII

Серологические тесты на ВИЧ-инфекцию Источник:

ПЦРRosenberg NE at al. // Curr Opin HIV AIDS. 2015 Jan;10(1):61-8.

Этап I. Скринингповтор ИФА/ИХЛА дваждыПервично-положительный скринингЭтап II. Подтверждение в референс-лабораторииИФА/ИХЛА альтернативная

ИММУННЫЙ БЛОТ Строение ВИЧ-1Полный иммунный блот с типичным набором антител к

Результаты иммунного блотаПоложительный: обязательно присутствуют антитела к двум из трех гликопротеинов